世界狂犬病日｜为了同一健康而努力

年9月28日是第十七个“世界狂犬病日”，今年的主题是“为了同一健康而努力（All for 1，One Health for All）”

狂犬病（Rabies）俗称疯狗病，又称恐水症，是由狂犬病病毒（Rabiesvirus，RV）感染引起的一种人兽共患的急性接触性传染病。狂犬病的临床表现大多为特异性恐风、恐水、咽肌痉挛、进行性瘫痪等，一旦发病，病死率几乎100%，给人类的生命健康带来严重威胁。

我国是狂犬病的高发地区，感染狂犬病死亡人数居世界第二，仅次于印度。当今世界，狂犬病仍然是一种高发的人畜共患病，无论在发达国家，还是发展中国家，都是重点防控的传染病。狂犬病在我国曾一度得到有效控制，值得关注的是我国城乡养犬、猫等宠物的家庭迅速增加，野犬、猫的数量均呈现增多趋势，使该病的发病率近年有上升趋势。

狂犬病病毒是弹状病科（Rhabdoviridae）狂犬病病毒属的成员，为不分节段的单股负链RNA病毒，基因组长度为11928nt～11932nt，编码5种结构蛋白，顺次为核蛋白（N）、磷酸蛋白（M1）、基质蛋白（M2）、糖蛋白（G）和RNA聚合酶（L），分别由对应的５种结构基因编码，其中Ｎ基因具有毒株间相对保守和高拷贝RNA复制的特点，成为病毒分型、系统发生分析和分子诊断的目标序列。

狂犬病病毒为弹状病毒，其头部为半球形，末端常为平端，形态呈典型的子弹状，长约130-240nm，直径65~80nm。

狂犬病毒具有两种主要抗原：一种是病毒外膜上的糖蛋白抗原，能与乙酰胆碱受体结合使病毒具有神经毒性，并使体内产生中和抗体及血凝抑制抗体，中和抗体具有保护作用；另一种为内层的核蛋白抗原，可使体内产生补体结合抗体和沉淀素，无保护作用。

狂犬病病毒有4种血清型和7种基因型，Ⅰ-Ⅳ基因型与4种血清型相对应；基因Ⅴ和基因Ⅵ型为欧洲蝙蝠狂犬病病毒EBL1和EBL2；基因Ⅶ型为澳大利亚蝙蝠狂犬病病毒。

狂犬病病毒具有一定的传染性，但狂犬病病毒感染者不是传染源，一般不会形成人与人之间的传播。携带狂犬病病毒的动物是传染源，狂犬病病毒主要通过破损的皮肤或黏膜侵入人体，少数也能经器官移植进行传播。

人感染狂犬病病毒主要是被携带狂犬病病毒的动物咬伤所致，也可以由带狂犬病病毒动物的唾液，经各种伤口、舔伤的黏膜和皮肤入侵感染，少数可在宰杀病犬、剥皮、切割等过程中被感染。另外，蝙蝠群居洞穴中的含病毒气溶胶也可经呼吸道传播。

多数动物实验证明，在潜伏期和发病期间并不出现病毒血症，狂犬病的发病过程可分为3个阶段。

（一）局部组织内繁殖期　

病毒自咬伤部位侵入后，于伤口的横纹肌肌梭感受器神经纤维处聚集繁殖，以后再侵入附近的末梢神经。从局部伤口至侵入周围神经的间隔时间一般为3日以内，也有认为病毒在入侵处可停留2周之久，甚或更长（占潜伏期的大部分时间）。

（二）侵入中枢神经期　

病毒沿周围神经的轴索浆向心性扩散，其速度约每小时3mm。到达背根神经节后，病毒即在其内大量繁殖，然后侵入脊髓和整个中枢神经系统，主要侵犯脑和小脑等处的神经元。

（三）向各器官扩散期　

病毒自中枢神经系统向周围神经离心性扩散，侵入各组织与器官，其中尤以唾液神经核、舌咽神经核和舌下神经核受损，临床上可出现恐水、呼吸困难、吞咽困难等症状。唾液分泌和出汗增多乃交感神经受刺激所致，迷走神经节、交感神经节和心脏神经节受损时可引起病人心血管功能紊乱或突然死亡。

狂犬病潜伏期通常为1-3个月，短则不到一周，长则一年，这取决于狂犬病毒入口位置和狂犬病毒载量等因素。狂犬病最初症状是发热，伤口部位常有疼痛或有异常或原因不明的颤痛、刺痛或灼痛感（感觉异常）。随着病毒在中枢神经系统的扩散，发展为可致命的进行性脑和脊髓炎症。可能出现以下两种情况：狂躁性狂犬病患者的症状是机能亢进，躁动，恐水，有时还怕风。数日后患者因心肺衰竭而死亡。麻痹性狂犬病约占人类死亡病例总数的20%。与狂躁性狂犬病相比，其病程不那么剧烈，且通常较长。从咬伤或抓伤部位开始，肌肉逐渐麻痹，然后患者渐渐陷入昏迷，最后死亡。麻痹性狂犬病往往会有误诊，造成狂犬病的漏报现象。

过去几十年来，尽管疫苗研究以及狂犬病的防治工作已经取得了很大进展，但全世界范围内每年因狂犬病而死亡的病例仍达到4000-70000例。非洲和亚洲是狂犬病流行的主要区域，在该地区狗是病毒最主要的宿主，也是引起人死亡的主要原因。

临床症状是诊断人和动物狂犬病的重要依据，但单凭临床表现还不够，还需通过狂犬病病毒的实验室检测才能确诊人和动物狂犬病。1903 年，Adolchi Negri 在狂犬病病毒感染组织细胞浆内发现了嗜酸性包涵体 - 内基氏小体，后被命名为Negri 小体。从此，Negri 小体被认为是狂犬病病毒感染的特征性病变，将检测 Negri 小体作为狂犬病的确诊方法持续了几十年。随着实验室诊断技术的不断发展，许多研究报道狂犬病病毒的感染并非总会出现 Negri 小体。

目前，狂犬病病毒的检测方法有：荧光抗体试验 (FAT)、快速狂犬病酶免疫诊断法(RREID)、小鼠颅内接种分离狂犬病毒法(MIT)、细胞培养分离技术 (CIT)、RT-PCR、荧光定量PCR 等。

其中，FAT需要荧光显微镜，且荧光阳性和阴性不易辨认，需要有经验的操作人员。

MIT和CIT耗时很长，并需要配合FAT技术才能判定结果。

RREID和胶体金免疫层析法简单、快速，但灵敏度不够，对于动物咽拭子等病毒含量较少的样品，检出率难以达到要求。

殷相平等建立的RT-PCR技术在狂犬病的分子生物学诊断上应用得最多最普遍，其特点是敏度高、特异性强，适合于实验室应用，但需要特定仪器，耗时较长。由于诊断仪器设备的缺乏，基层防疫机构难以进行狂犬病病毒的检测。

重组酶和聚合酶扩增是一种新型的等温扩增技术，其基本原理是在恒温条件下，重组酶与寡核苷酸引物结合，形成酶和引物的复合体，酶促使引物定位在DNA双链模板的同源靶序列上，并在单链DNA结合蛋白的协助下，解链模板DNA，随后在DNA聚合酶的作用下，形成新的DNA互补链，从而实现了扩增。

重组酶和聚合酶扩增方法反应操作简便、对仪器要求较低。反应温度为37~ 42℃，无需变温，消耗时间短，5~20min即可得到检测结果。加入荧光探针，可以实时观察到检测结果。非常适用于基层诊断实验室和养殖场检测。