重磅｜RAPID-高效快速的核酸扩增检测技术

重组酶和聚合酶等温检测是什么？

重组酶和聚合酶等温检测（Recombinase And Polymerase Isothermal Detection, RAPID）技术，是一种等温核酸扩增技术，可在等温条件下(30℃- 45℃，一般为37℃-42℃)，5-20min内，即可实现对目的核酸片段的扩增，是模拟生物体内核酸复制机制，采用基因工程改造的重组酶和聚合酶，结合单链结合蛋白及辅助蛋白，实现对核酸的等温扩增。

RAPID基本原理是什么？

RAPID技术主要使用了四种酶：重组酶、DNA聚合酶、单链结合蛋白和辅助蛋白，整个扩增过程大体可分为三个过程：

①重组酶和引物形成重组酶-引物复合物，在DNA双链中寻找与引物同源序列，形成D-环结构；

②在DNA聚合酶的作用下，催化链的延伸，生成新的DNA链；

③被替换的单链DNA与单链结合蛋白结合，防止单链DNA再度复性为双链DNA。经过数十分钟，DNA新链的数量指数增长。

RAPID的技术特点是什么？

（1）等温扩增

RAPID的最佳反应温度为37℃~42℃，摆脱精密仪器的束缚，使现场检测（POCT）成为可能。

（2）检测快速

5-20min内即可实现对目的核酸片段的扩增，非常符合快速检测的需求。

（3）高灵敏度

具有同PCR同等的灵敏度，可检测到单拷贝核酸分子。

（4）设计简单

引物设计形式和设计方法同PCR类似，略微不同的是RAPID的引物长度要比PCR的长。

（5）检测方式多样化

RAPID的扩增产物为单一的双链DNA，与目前主流PCR产物类型一致，PCR产物检测方式均可用在RAPID的产物检测中。

（6）操作简单

RAPID的操作过程非常简单，只需要将相关溶液简单加入到试剂中即可，且整个加入过程都在室温下进行，无需冰上操作。

RAPID与其他扩增技术的比较

RAPID可以在哪些方面应用

RAPID可用于病原体的检测和突变基因的检测，包括不限制于体外诊断，动植物疫病检测、宠物病原体检测、肠道微生物检测、食源性微生物检测等。